材料與方法

熒光倒置顯微鏡，日本 Nikon 株式會社 ( 型號: Ti-U) ; 離心機，德國 Hettich zentrifugen 公司( 型 號: Ｒotina 420) ; CO2 細胞培養箱，德國美墨爾特公司 ( 型號: INCO 108) ; 生物安全柜，芬蘭 Kojair Tech Oy 公 司( 型號: BioWizard Sliver SL-130 Class Ⅱ) ; 水浴鍋，德 國美墨爾特公司( 型號: WNB29L4 L612．0144) ; 水平 搖床，中國其林貝爾公司( 型號: TS-2) ; 梯度 PCＲ 儀， 日本 Astec 公司( 型號: G02) ; 實時熒光定量 PCＲ 儀，美 國 ABI 公司( 型號: 7500 Fast Ｒeal-Time PCＲ System) ; 電泳槽，美國 Bio-Ｒad 公司( 型號: Mini-PＲOTEAN Tetra System) ; 顯影儀，美國 Bio-Ｒad 公司( 型號: Chemidoc) ， 半干轉轉膜儀，美國 Bio-Ｒad 公司( 型號: Trans-Blot SD Cell) 。將凍存的 HepG2 細胞放入 37 ℃ 水 中解凍，搖晃使其融化。用一次性移液器吸取多余培 養基至細胞瓶內( 剩余培養基為 5 mL 左右) ，將細胞瓶 放入顯微鏡下觀察細胞狀態，隨后放入細胞培養箱。

結果

與空白對照組比較，各劑量 ox-LDL 誘導模型組 HepG2 細胞 miＲ-33a 基因表達量顯著增加( P＜0．01) 。 與模型組比較，辛伐他汀組顯著降低 20、40、160 mg /L ox-LDL 誘 導 HepG2 細 胞 后 miＲ-33a 的 表 達 水 平 ( P＜0．01) 。與 模 型 組 比 較，冠 心 康 顯 著 下 調 各 組 HepG2 細胞 miＲ-33a 表達水平( P＜0．01) 。組間 方 差 分 析 可 見，用 20 mg /L ox-LDL 誘 導 HepG2 細胞 24 h 后，模型組細胞出現 miＲ-33a 過表達 ( P＜0．01) 。從 40 mg /L ox-LDL 誘導開始，模型組細胞 miＲ-33a 的表達受到抑制，但仍高于空白對照組，隨著 濃度升高，該抑制效果逐漸減輕。microＲNA 是一種長度約為 18 ～ 24 個核苷酸且廣 泛參與外周血循環的微小非編碼單鏈 ＲNA。miＲ-33 被廣泛認為是脂質調節的一個重要調控因子，有學者 發現抗 miＲ-33 寡核苷酸可以大幅增加 HDL 水平。 其機制可能是 miＲ-33 在體內通過膽固醇逆向轉運來 調節血漿 HDL 水平。當細胞內的膽固醇低于基 線水平時，miＲ-33a 抑制 NPC1 表達，一方面促進內源 性膽固醇合成和胞外攝取，另一方面抑制 27-羥基膽甾 醇，減少膽固醇流出。

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